"A-431 Adherent人皮膚鱗癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克??；是一個超三倍體人細胞株。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-431 Adherent人皮膚鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
細胞生長特性：貼壁生長
A-431 Adherent人皮膚鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
HCT116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
A-431 Adherent人皮膚鱗癌細胞系
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
AD-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
Plaepi 34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
RAT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
A-431 Adherent人皮膚鱗癌細胞系
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、RCF細胞、ID8/MOSEC細胞
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、SKBR-3細胞、MDCC MSB1細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、OSKM-1細胞、DI TNC1細胞
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