"Calu-1 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Calu-1 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經驗總結，這里說一些我個人的經驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
DAN-G細胞系相關產品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產品：NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
CORL23細胞系相關產品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
細胞傳代方法：消化１０分鐘。１：２。３-４天長滿
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-1341細胞系相關產品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
U-343 MG細胞系相關產品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
NCIH838細胞系相關產品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
細胞生長特性：貼壁生長
Calu-1 Adherent人肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
HEK293-EBNA1細胞系相關產品：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞
HCM細胞系相關產品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
GL-261細胞系相關產品：Hs-746T細胞、NCI-H1623細胞、CCLP-1細胞
KYSE-410細胞系相關產品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關產品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞
RD-ES細胞系相關產品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
IMR-32細胞系相關產品：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞
NCI-H1954細胞系相關產品：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
HOS/MNNG細胞系相關產品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
H2444細胞系相關產品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
NCIH522細胞系相關產品：Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
MC-CAR細胞系相關產品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
Calu-1 Adherent人肺腺癌細胞系
RKO-E6細胞系相關產品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
L-6TG細胞系相關產品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
SCCVII細胞系相關產品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
SCCVII細胞系相關產品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
HANK細胞系相關產品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
Soleus clone 8細胞系相關產品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
H-295細胞系相關產品：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
PA I細胞系相關產品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
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H-157細胞系相關產品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
RH-35細胞系相關產品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
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MCF-10A細胞系相關產品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
Panc 02.03細胞系相關產品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
NBLAN5T細胞系相關產品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
H-211細胞系相關產品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
HCET細胞系相關產品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
Huh-7.5.1細胞系相關產品：L-cells細胞、NPA87細胞、SMA-560細胞
HCC0202細胞系相關產品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關產品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
G361mel細胞系相關產品：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
JTC-28細胞系相關產品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
C-4I細胞系相關產品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
SB細胞系相關產品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
Ca Ski細胞系相關產品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
NG-108-15細胞系相關產品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
HOC1細胞系相關產品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
U-118 MG細胞系相關產品：DH82細胞、NTHY-ORI3.1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關產品：KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
Hs 729.T細胞系相關產品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
FOX-NY細胞系相關產品：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
LC-2-Ad細胞系相關產品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
HCC941122細胞系相關產品：NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞
J-774細胞系相關產品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
HeLa S 3細胞系相關產品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
MC/CAR細胞系相關產品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
WEHI-279細胞系相關產品：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關產品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
Calu-1 Adherent人肺腺癌細胞系
Lu-65細胞系相關產品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
A-172 MG細胞系相關產品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
MV4-11細胞系相關產品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
Balb/c 3T3細胞系相關產品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
FRTL5細胞系相關產品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
DC2.4細胞系相關產品：Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
NCI-H1435細胞系相關產品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
Wien-133細胞系相關產品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
KMST6細胞系相關產品：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞
HEC1B細胞系相關產品：PTK 2細胞、ST細胞、NCI-H1781細胞
RL-95-2細胞系相關產品：SK-ES-1細胞、Hs 606.T細胞、UMNSAH-DF 1細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產品：MHCC 97-H細胞、MGSMC細胞、SHG44細胞
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