"Calu-3 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的;該患者曾使用過(guò)環(huán)磷酰胺、博來(lái)霉素、阿霉素進(jìn)行治療。該細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;可作轉(zhuǎn)染宿主。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Calu-3 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專(zhuān)題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見(jiàn),可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題,很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到,雖然通過(guò)其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:消化20分鐘。1:2。5-6天長(zhǎng)滿。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
Calu-3 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
接收細(xì)胞相關(guān)問(wèn)題:如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞,T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過(guò)夜,血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境,同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細(xì)胞可以離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
SW 1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞
Calu-3 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR5細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
RIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞
SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞
L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
Y3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞
RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞
COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
Calu-3 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
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