"KHYG-1 Lymphoblastoid cells人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：NK細胞淋巴瘤/白血??；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
Bovine ENDometrial cells細胞系相關產(chǎn)品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
SUDHL-6細胞系相關產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
HBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
細胞生長：懸浮
KHYG-1 Lymphoblastoid cells人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用，近年來細胞學蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜，需要的實驗設備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BNCL2細胞系相關產(chǎn)品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
A 549細胞系相關產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
GC-1細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
C12細胞系相關產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KHYG-1 Lymphoblastoid cells人NK細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
SW962細胞系相關產(chǎn)品：A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
NMC-G1細胞系相關產(chǎn)品：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
SACC-LM細胞系相關產(chǎn)品：HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
NCI-BL6細胞系相關產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
2V6.11細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
SuDHL 2細胞系相關產(chǎn)品：DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
HMC細胞系相關產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
KHYG-1 Lymphoblastoid cells人NK細胞淋巴瘤細胞系
IHH細胞系相關產(chǎn)品：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
HCC-202細胞系相關產(chǎn)品：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
LNCaP C4-2細胞系相關產(chǎn)品：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
SKml2細胞系相關產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
VM Cub 1細胞系相關產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
Panc-1-P細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
Panc-1-P細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
NCIH2141細胞系相關產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
M14-MEL細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
R1610細胞系相關產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
CDC/EU.HMEC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2227細胞、SKN-SH細胞、NCI-H209細胞
MA-782細胞系相關產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
SEG-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
D324 Med細胞系相關產(chǎn)品：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞
MG-63細胞系相關產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
CL1細胞系相關產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
SHP-77細胞系相關產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
Douglas Foster-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
CSQT-2細胞系相關產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
EFO-27細胞系相關產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
G-402細胞系相關產(chǎn)品：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
Hs1.Tes細胞系相關產(chǎn)品：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
NGP細胞系相關產(chǎn)品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
EFO 27細胞系相關產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
NCIH647細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
MOLT 4細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
HPAF-2細胞系相關產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
L5178Y-R細胞系相關產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
MFE-296細胞系相關產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
3T3J2細胞系相關產(chǎn)品：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞
COS7細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
RBL-2H3細胞系相關產(chǎn)品：EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
SK RC 52細胞系相關產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
NCIH23細胞系相關產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
LC-1Sq細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
RIN-14B細胞系相關產(chǎn)品：Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
GM04154B細胞系相關產(chǎn)品：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
H-1963細胞系相關產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
EL4細胞系相關產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
HMCB細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
PANC1005細胞系相關產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
U-251-MG細胞系相關產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
BA/F3細胞系相關產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
KHYG-1 Lymphoblastoid cells人NK細胞淋巴瘤細胞系
Nittby-Salford 1細胞系相關產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-2細胞、PFSK1細胞、M20 [Human melanoma]細胞
COLO 699細胞系相關產(chǎn)品：TE671/RD細胞、NCI-H2066細胞、N1E-115細胞
NMC-G1細胞系相關產(chǎn)品：MB157細胞、HIT.T15細胞、SupT1細胞
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