"EM-3 Lymphoblastoid cells人髓系白血病細胞系
細胞背景資料：髓系白血病；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
BIU-87細胞系相關產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
細胞生長：懸浮
EM-3 Lymphoblastoid cells人髓系白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TE3細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
NCI-SNU-16細胞系相關產(chǎn)品：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
ATN1細胞系相關產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
HPC-Y5細胞系相關產(chǎn)品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
SCL-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EM-3 Lymphoblastoid cells人髓系白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
L-02細胞系相關產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
NP69SV40T細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
HCC1419細胞系相關產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
RT-4細胞系相關產(chǎn)品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
COLO 205細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
PA I細胞系相關產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
SCI1細胞系相關產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
U-hth74細胞系相關產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
EM-3 Lymphoblastoid cells人髓系白血病細胞系
LS 513細胞系相關產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
H-1838細胞系相關產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
H-1437細胞系相關產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
H-1876細胞系相關產(chǎn)品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
HCC2279細胞系相關產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
NW38細胞系相關產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
NCI-H1930細胞系相關產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產(chǎn)品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
Madison 109細胞系相關產(chǎn)品：NCI-BL2141細胞、SK RC 52細胞、H510細胞
HeLa S3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
A-2058細胞系相關產(chǎn)品：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
EFM19細胞系相關產(chǎn)品：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞
CG4細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
HT 1376.T細胞系相關產(chǎn)品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
SUM 52細胞系相關產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
SF17細胞系相關產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
MCF10A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關產(chǎn)品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
HCEpiC細胞系相關產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
MHH-CALL2細胞系相關產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
SW-962細胞系相關產(chǎn)品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
NCIH1568細胞系相關產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
OV2008細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
293AD細胞系相關產(chǎn)品：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
JEKO細胞系相關產(chǎn)品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
HGC-27細胞系相關產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
Med 283細胞系相關產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
KP2細胞系相關產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
HEC-151細胞系相關產(chǎn)品：HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
AR41P細胞系相關產(chǎn)品：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品：HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
CALU1細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
CF-1 MEF細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
RPMI-7666細胞系相關產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
SCC 4細胞系相關產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
HuPT4細胞系相關產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
CHO-K1細胞系相關產(chǎn)品：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
T47-D細胞系相關產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
HEK-293A細胞系相關產(chǎn)品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
CD 18細胞系相關產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
DBTRG-05MG細胞系相關產(chǎn)品：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞
NKL細胞系相關產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
ROS 17/28細胞系相關產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
Kasumi-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
CCC-HPF-1細胞系相關產(chǎn)品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關產(chǎn)品：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞
EM-3 Lymphoblastoid cells人髓系白血病細胞系
DF-1細胞系相關產(chǎn)品：H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品：HHFK細胞、NCI-H322細胞、SU-DHL-16細胞
D-324 Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-182細胞、Colo-206F細胞、C6細胞
HCC-1419細胞系相關產(chǎn)品：Adeno 293細胞、COV 504細胞、SuDHL 10細胞
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