"NALM-6 Lymphoblastoid cells人急性B淋巴白血病細胞系 細胞背景資料:急性B淋巴細胞白血??;男性 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 SKMES細胞系相關產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞 TE354T細胞系相關產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞 NCCIT細胞系相關產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞 細胞生長:懸浮 NALM-6 Lymphoblastoid cells人急性B淋巴白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 184A1細胞系相關產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞 aTC1-6細胞系相關產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞 EST81細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞 NRK-49F細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞 SK-N-DZ細胞系相關產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NALM-6 Lymphoblastoid cells人急性B淋巴白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞 H-146細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞 6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 V79-1細胞系相關產(chǎn)品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞 MeSoTheliOma-211H細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞 HSC-T6細胞系相關產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞 IHH細胞系相關產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞 BetaTC6細胞系相關產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞 OKT3細胞系相關產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞 U87-MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 NALM-6 Lymphoblastoid cells人急性B淋巴白血病細胞系 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 SKNMC細胞系相關產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞 AAV-293細胞系相關產(chǎn)品:P19細胞、A1847細胞、HECV細胞 Rat Fetal Lung-6細胞系相關產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞 U20-S細胞系相關產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 HPB/ALL細胞系相關產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 HPB/ALL細胞系相關產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 NCI H23細胞系相關產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞 Balb/c 3T3細胞系相關產(chǎn)品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞 CTLL-2細胞系相關產(chǎn)品:M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞 C-4I細胞系相關產(chǎn)品:BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞 PL 5細胞系相關產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞 DoTc2 4510細胞系相關產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞 PANC-1細胞系相關產(chǎn)品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞 PaTu 8988 S細胞系相關產(chǎn)品:Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞 COR-L26細胞系相關產(chǎn)品:EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 HRC-99細胞系相關產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞 H22細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞 MGSMC細胞系相關產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞 BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞 IGROV細胞系相關產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞 MV3細胞系相關產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞 WM266mel細胞系相關產(chǎn)品:Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞 U 937細胞系相關產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞 HEK;293細胞系相關產(chǎn)品:HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞 HUT125細胞系相關產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞 SW 48細胞系相關產(chǎn)品:HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞 NCI-H2286細胞系相關產(chǎn)品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞 Psi-2 DAP細胞系相關產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞 OB2細胞系相關產(chǎn)品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞 BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 GOS3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞 IPECJ2細胞系相關產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞 NCIH441細胞系相關產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞 Panc_08_13細胞系相關產(chǎn)品:CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞 NTC200細胞系相關產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞 NTC200細胞系相關產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞 SKNEP-1細胞系相關產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞 Caov-3細胞系相關產(chǎn)品:BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞 BI-Mel細胞系相關產(chǎn)品:KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞 SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞 HCT-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞 EA. hy 926細胞系相關產(chǎn)品:SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞 NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞 NB9細胞系相關產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞 GM06141細胞系相關產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 C-127細胞系相關產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞 Rat podocyte細胞系相關產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞 SUPM2細胞系相關產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞 NALM-6 Lymphoblastoid cells人急性B淋巴白血病細胞系 CEMx721.174.T2細胞系相關產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 H1184細胞系相關產(chǎn)品:OV-CA 432細胞、HUVSMC細胞、B 95.8細胞 JM1細胞系相關產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、KYSE140細胞、H-1993細胞 6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、H1930細胞、A-172 MG細胞 "
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