"NOMO-1 Lymphoblastoid cells人白血病細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
細胞生長：懸浮
NOMO-1 Lymphoblastoid cells人白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代；
SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NOMO-1 Lymphoblastoid cells人白血病細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
NCIH378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
CCRFCEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM-1S細胞、SR786細胞、HTori:3細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
NOMO-1 Lymphoblastoid cells人白血病細胞系
SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
LICR-HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
ARO81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
HEK 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKML-28細胞、FHs 74 Int細胞、BHT-101細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
RL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
hFOB1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
SuDHL 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
LU65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞
NOMO-1 Lymphoblastoid cells人白血病細胞系
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、SUM102PT細胞、Hs-675-T細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、SK-MEL-MeWo細胞、HCT-8細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、MKN-74細胞、U373 MG細胞
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