"TF-1 Lymphoblastoid cells人紅系白血病細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞 C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞 DMS79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 TF-1 Lymphoblastoid cells人紅系白血病細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細(xì)胞傳代方法:維持細(xì)胞濃度在3×104-5×105 cells/ml;2-3天換液1次。 Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞 Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞 HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞 HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞 KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 TF-1 Lymphoblastoid cells人紅系白血病細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞 MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞 NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞 Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞 GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞 MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞 HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞 C-33 A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞 BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞 TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞 TF-1 Lymphoblastoid cells人紅系白血病細(xì)胞系 LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞 SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞 Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞 T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞 GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞 Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞 Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞 DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞 Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞 CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞 MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞 TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞 HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞 N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞 DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞 SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞 OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞 Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞 Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞 SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞 MES-SA-Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞 H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞 FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞 Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞 A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞 Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞 Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞 HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞 MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞 HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞 OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞 McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞 EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞 QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞 MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞 M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞 MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞 As-PC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細(xì)胞、U373細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞 PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞 SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞 Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞 EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞 HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞 KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞 Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞 BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞 HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞 TF-1 Lymphoblastoid cells人紅系白血病細(xì)胞系 Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞 L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR 106細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞 PG-4 (S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、PANC403細(xì)胞 NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell 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