"Ku812 Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 NCI-H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞 253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 細胞生長:懸浮 Ku812 Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿 LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞 C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞 KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Ku812 Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:骨髓母細胞 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞 BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞 U-CH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞 Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞 T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞 Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞 F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞 Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞 SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞 Ku812 Lymphoblastoid cells人外周血嗜堿性白血病細胞系 HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞 WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞 Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞 Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞 Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞 ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞 EB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞 EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞 LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞 BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞 Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞 PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞 NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞 PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞 RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞 HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞 Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞 CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞 Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞 PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞 X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞 LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞 SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞 GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞 SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞 HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞 NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞 KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞 Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞 Panc_05_04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞 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3T6細胞 SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、ECC12細胞、NCIH2171細胞 "
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