"YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:YAC-1源自Mo-MuLV誘導(dǎo)的A/Sn小鼠淋巴瘤。細(xì)胞對NK細(xì)胞的作用敏感,可用于NK細(xì)胞活性檢測。鼠痘病毒陰性。 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞 Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞 CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞 hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞 CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞 NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞 KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞 MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞 NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞 H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞 Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞 MGH-U1 (EJ)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞 SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細(xì)胞系 K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞 HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞 CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞 MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞 Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞 A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞 SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞 M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞 BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞 IMR 90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞 KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞 P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞 RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞 NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞 HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞 H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞 COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞 HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞 HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞 32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞 HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞 HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞 MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞 PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞 Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞 Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞 H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞 Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞 A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞 BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞 M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞 SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞 Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞 SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞 MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞 ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞 YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞 RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞 COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞 HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞 NCI-H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞、H-196細(xì)胞 KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞 C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞 H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞 NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞 NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞 SUM102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細(xì)胞、GS9L細(xì)胞、H2.35細(xì)胞 L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞 Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細(xì)胞系 KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞 174xCEM.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、HCT15細(xì)胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細(xì)胞、H341細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞 MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、L-929細(xì)胞 "
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