"NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
HuT-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代
DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞
HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
Tu 177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
RIN Cl-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
NIH:OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞
SK-N-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細(xì)胞系
NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞
HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
CCD19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
hFOB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞
Pt K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
GDM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
EFM-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞、HT-115細(xì)胞
Swiss 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
NFS-60 Lymphoblastoid cellsG-CSF依賴性小鼠白血病細(xì)胞系
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞
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