"MEG-01 Lymphoblastoid cells人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:MEG-01細(xì)胞株源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞。細(xì)胞質(zhì)因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,-Schiff(PAS)反應(yīng),α醋酸酯酶和酸性酶陽性。髓過氧化物酶,α酯酶,化醋酸AS-D酯酶和堿性酶陰性。用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞,粒性白細(xì)胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細(xì)胞,血小板)染色成陽性。其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。 Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞 DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞 IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞 細(xì)胞生長:懸浮 MEG-01 Lymphoblastoid cells人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。 T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞 Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞 KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞 OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞 JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MEG-01 Lymphoblastoid cells人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:懸浮生長 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞 Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞 118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞 IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞 HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞 LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞 38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞 MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞 OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞 CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞 MEG-01 Lymphoblastoid cells人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系 BJA-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞 RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞 OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞 H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞 H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞 NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞 YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞 MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞 H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞 SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞 HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞 293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞 H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞 BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞 H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞 REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞 OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞 KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞 HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞 LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞 SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞 AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞 H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞 NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞 A375-S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞 HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞 OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞 Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞 266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞 EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞 OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞 HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞 OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞 SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞 HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞 RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞 MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞 HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞 FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞 NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞 MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞 G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞 IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞 Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞 JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞 Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞 MEG-01 Lymphoblastoid cells人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系 Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、DF-1細(xì)胞 MESSA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PASMCS細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞 118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE3細(xì)胞、HMC細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞 "
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