"RAT2 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：成纖維細(xì)胞；自發(fā)永生；Fischer ３４４
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
RAT2 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RAT2 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
L Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
RAT2 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
H-2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、C1R細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
SW-1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
WSUDLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HPF-1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞、LAN5細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
Nthy-ori 3-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細(xì)胞、LYR細(xì)胞、L 929細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
SUM 190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
TMD-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細(xì)胞、T-47D細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞
SF17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
RAT2 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1563細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
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