"LTEP-sm epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:小細胞肺癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! MFM223細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞 C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞 H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞 細胞生長:貼壁 LTEP-sm epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥N艺務(wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞 Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞 NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞 PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞 NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 LTEP-sm epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞 JEKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞 HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞 NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞 Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 Th17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞 MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞 231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞 MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞 LTEP-sm epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞 G-292 clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB2細胞、NCIH244細胞、LLC1細胞 SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞 SF126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞 KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞 CT26.CL25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞 CT26.CL25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞 MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞 U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞 BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞 SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞 Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞 RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞 HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞 JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞 SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞 Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞 LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞 U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞 MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞 MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞 L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞 SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞 AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞 ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞 TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞 HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞 SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞 ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞 HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞 MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞 SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞 WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞 H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞 L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞 COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞 SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 C81-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞 NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞 149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞 MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞 GLC-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞 M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞 JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞 Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞 LTEP-sm epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2591細胞、MBT2細胞、SW579細胞 NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、293E細胞、H-23細胞 HT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE353.SK細胞、BEL 7405細胞、SJRH-30細胞 "
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