"hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞系 細胞背景資料:子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞;永生化;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞 UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞 細胞生長:貼壁 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞 CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞 LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞 U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞 L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞 Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞 HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞 Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞 COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞 CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞 MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞 HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞 WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞系 SNU354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞 CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞 Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞 CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞 C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞 3T3J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞 Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞 U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞 WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞 Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞 A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞 SU86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞 Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞 B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞 Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞 GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞 Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞 NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞 Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞 P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞 THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞 RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞 SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞 H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞 HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞 J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞 Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞 624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞 SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞 Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞 NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞 Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞 GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞 NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞 L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞 Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞 Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞 MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞 hEM15A epithelioid cells人永生化子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞系 CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞 L2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D562細胞、SK BR 03細胞、RS1細胞 BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hs 934.T細胞、HuT 78細胞 JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、FU-MMT-1細胞、H1876細胞 "
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