"IOSE-29 epithelioid cells人卵巢上皮細胞系 細胞背景資料:卵巢;上皮細胞;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞 MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞 NBL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞 細胞生長:貼壁 IOSE-29 epithelioid cells人卵巢上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞 TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 CC-LP-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA Dx5細胞、NCIH2052細胞、OVHM細胞 WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞 H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 IOSE-29 epithelioid cells人卵巢上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞 HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞 KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞 Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞 NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞 Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞 Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞 NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞 IOSE-29 epithelioid cells人卵巢上皮細胞系 TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞 HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞 MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞 CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞 HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞 MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞 H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞 M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞 MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞 Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞 H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞 MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞 1E8-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞 GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞 WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞 HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞 PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞 SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞 MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞 FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞 293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞 ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞 GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞 KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞 Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞 NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞 KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞 MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞 TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞 LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞 DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞 H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞 RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞 H-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞 T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞 HO8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞 J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞 CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞 NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞 M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞 8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞 Rat podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞 NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞 DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞 Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞 HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞 HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞 IOSE-29 epithelioid cells人卵巢上皮細胞系 PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、OVCAR 432細胞、CEMC7細胞 K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、SNU16細胞 Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細胞、NCIH1341細胞、T-T細胞 "
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