"M21 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
SK-N-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
UT7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
M21 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞
MCF10-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、SNU251細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
M21 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細(xì)胞、A431/P細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
M21 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
UMR-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
3T3L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATHa細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
NCI-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM1細(xì)胞、H1522細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞
HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞
HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞
Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞
NCI-H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞
M21 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細(xì)胞、STO細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
COLO320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 7860細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
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