"M21 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:黑色素瘤;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 SK-N-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞 UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞 細胞生長:貼壁 M21 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞 RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞 MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 M21 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞 EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞 COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞 U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞 OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞 MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞 Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞 J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞 NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞 NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞 M21 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞 MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞 NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞 BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 BCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞 CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞 CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞 MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞 NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞 LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞 UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞 BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞 3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞 RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞 IPEC-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞 P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞 A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞 3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞 H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞 no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞 NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞 H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞 CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞 RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞 3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞 Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞 Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞 NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞 HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞 PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞 BSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞 BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞 KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 TSCCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞 HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 OKAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞 J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞 HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞 NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞 CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞 NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞 M21 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、OCI-AML3細胞、KHYG細胞 TE-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4:11細胞、STO細胞、SNU886細胞 COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、BMU-S1細胞、H2052_MM細胞 "
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