"CZ-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞背景資料:骨髓瘤;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
細胞生長:貼壁
CZ-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CZ-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
HO-1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGLH7細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、HUSMC細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
P3/X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
CZ-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
RAW 264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
CL MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
CCD18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
LMTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
NCI-H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞
CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
AZ-521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
NB9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
C4-2 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
CZ-1 epithelioid cells人多發(fā)性骨髓瘤細胞系
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Hs-695-T細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細胞、Jurkat77細胞、Pt K1細胞
HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、Mel-RM細胞、PFSK細胞
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