"PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:前列腺癌;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞 NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞 KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞 NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞 NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞 Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞 HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞 SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞 HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞 FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞 GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞 HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞 HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞 HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞 CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞 Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞 SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞 H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞 NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞 NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞 H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞 H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞 NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞 SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞 JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞 HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞 BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞 DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞 MDCK Type II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞 A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞 C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞 BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞 NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞 MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞 HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞 MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞 MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞 A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞 NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞 CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞 SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞 Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞 H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞 HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞 LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞 GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞 Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞 COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞 GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞 NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞 A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞 V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞 Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞 L132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞 MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞 HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞 P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞 QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞 SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞 NCI-H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細(xì)胞、H1693細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞 TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞 AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞 CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞 THLE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞 PC-3M-1E8 epithelioid cells人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系 NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞 N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 ANA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-127細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞 HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、50.B1細(xì)胞 "
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