"PC-3 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:PC-3源于一位62歲白人男性IV級前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶;有低水平的酸性酶活性和5-α-睪酮還原酶活性。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞 ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞 SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 細胞生長:貼壁 PC-3 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞 VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞 293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞 VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 PC-3 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞 KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞 ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞 MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞 SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞 Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞 RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞 HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞 SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞 LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞 PC-3 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞 NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞 HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞 EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞 SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞 SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞 RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞 P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞 IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞 SUP-B15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞 NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞 HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞 OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞 KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞 HC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞 RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞 IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞 OLN 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細胞、NCI-H2452細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞 Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞 SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞 BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞 Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞 CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞 EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞 M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞 P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞 CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞 Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞 JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞 High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞 TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞 HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞 RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞 OCUM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細胞、NCI-H1666細胞、HEK (AD293)細胞 RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞 Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞 H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞 Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞 NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞 OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞 RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞 SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞 PC-3 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES-1細胞、GLRK 13細胞、VeroC1008細胞 PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK 10細胞、3T6 Swiss Albino細胞、COLO-741細胞 ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、FF-WT-BJ細胞、PANC0403細胞 "
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