"FHC epithelioid cells人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:胎兒;結(jié)腸;自發(fā)永生;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 CEM/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞 H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞 NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 FHC epithelioid cells人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細(xì)胞計數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進行活細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞 Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞 HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞 KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞 P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 FHC epithelioid cells人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞 DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞 QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞 LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞 NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞 Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞 LCLC103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞 NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞 FHC epithelioid cells人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系 4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞 H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞 LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞 EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞 T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞 D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞 D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞 NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞 HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞 OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞 H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞 COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞 BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞 MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞 UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞 Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞 SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞 H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞 GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞 HT 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞 IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞 P3-X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞 SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞 HCC-1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞 Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細(xì)胞、MDA415細(xì)胞、HPAC細(xì)胞 T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞 A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞 FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞 NCI-H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞 LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130 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