"Nthy-ori 3-1 epithelioid cells人甲狀腺正常細胞系

細胞背景資料：甲狀腺；SV４０轉(zhuǎn)化；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。

RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞

Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞

BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞

細胞生長：貼壁

Nthy-ori 3-1 epithelioid cells人甲狀腺正常細胞系

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

M3 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞

HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞

Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞

H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

Nthy-ori 3-1 epithelioid cells人甲狀腺正常細胞系

細胞生長特性：貼壁

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞

HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞

TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞

Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞

NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞

Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞

HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞

SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞

MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞

SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞

Nthy-ori 3-1 epithelioid cells人甲狀腺正常細胞系

C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞

GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞

LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞

NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞

U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞

1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞

1301細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細胞、CoCL2細胞、PSN-1細胞

MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞

D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞

HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞

KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞

R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞

H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞

HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞

Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞

NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞

SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞

NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞

HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞

TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞

OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞

A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞

Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞

HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞

B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞

MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞

OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞

NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞

LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞

Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞

Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞

ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞

HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞

HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞

MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞

DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞

Panc 8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞

Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞

Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞

Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞

TB1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞

SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞

GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、GM03320細胞、H-2141細胞

H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞

BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞

PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞

MV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞

Nthy-ori 3-1 epithelioid cells人甲狀腺正常細胞系

VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞

GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H460細胞、HT1080細胞、McG-1細胞

RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、SNU-C1細胞、P116細胞

TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細胞、SU-DHL-2細胞、GA-10細胞

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