"WM35 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
SKGIIIA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
細胞生長：貼壁
WM35 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WM35 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
Ramos (RA)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
WM35 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
MRC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
NU-GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
H-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞
Panc_08_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
RL952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞
STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
WM35 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT 2細胞、HSC（Human Schwann）細胞、HHFK細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細胞、MES13細胞、RC-2細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細胞、CCD841CoN細胞、NCIH2342細胞
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