"KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：來(lái)源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話(huà)那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類(lèi)是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)及一些喹諾酮;其他類(lèi)抗生素如基糖苷類(lèi)、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話(huà)，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn)，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話(huà)在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話(huà)盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細(xì)胞系
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細(xì)胞、THP1細(xì)胞、HGC27細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
LX-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
CMT-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細(xì)胞、D341MD細(xì)胞、H1105細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
SKNF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞
KYSE 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細(xì)胞系
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細(xì)胞、HFF細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
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