"BT-B epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞 CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞 細胞生長:貼壁 BT-B epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞 H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞 HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞 HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞 HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BT-B epithelioid cells人膀胱癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞 H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞 108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞 SK-UT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞 WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞 CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞 RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 BT-B epithelioid cells人膀胱癌細胞系 MG63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞 J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞 Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞 Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞 3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞 NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞 MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞 GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞 T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞 NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞 A-431細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞 MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞 HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞 DHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞 SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞 LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞 BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞 H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞 KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞 DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞 NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞 HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞 Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞 A2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞 SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞 KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 NCI H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞 SNU354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞 HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞 OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞 SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞 HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞 HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞 786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞 CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞 CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞 BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞 LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞 HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞 SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞 MCCAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞 HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞 SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞 BT-B epithelioid cells人膀胱癌細胞系 P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞 Colon 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細胞、Hs 832(C).T細胞、Neukoplast細胞 526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細胞、HBL1細胞、MDAMB231細胞 P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細胞、HTh74細胞、NCI-441細胞 "
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