"U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：U-２５１ MG分離至一位患者的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
NTera-2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞、TKB1細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
ARO 81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC-11細(xì)胞、MV-3細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
USMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
JS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
U-251MG epithelioid cells人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細(xì)胞、BT483細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
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