"HPDE epithelioid cells胰腺正常導管上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
293/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
細胞生長：貼壁
HPDE epithelioid cells胰腺正常導管上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２傳代
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HPDE epithelioid cells胰腺正常導管上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
JOSK-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
YD15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞
KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
HPDE epithelioid cells胰腺正常導管上皮細胞系
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
CemT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
EST81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
WM451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
HCC78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
COLO 320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
PLA 802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
HPDE epithelioid cells胰腺正常導管上皮細胞系
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細胞、NCI-H460細胞、HEK293EBNA細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細胞、SKG-IIIa細胞、H716細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、AML193細胞、A875細胞
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