Hoechst33258染色試劑盒

中文名稱：Hoechst33258染色試劑盒

英文名稱：Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T

細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生最顯著的變化是染色體固縮，DNA 裂解使細(xì)胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258 是一種無(wú)毒、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA 分子結(jié)合。

在凋亡細(xì)胞中，細(xì)胞膜對(duì)Hoechst 33258 的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮，Hoechst 33258 與之結(jié)合增強(qiáng)，染色呈強(qiáng)藍(lán)色熒光，而正常細(xì)胞只呈微弱熒光，死細(xì)胞則不被染色，由此可檢測(cè)出凋亡。

注意事項(xiàng)
1. 染色時(shí)間嚴(yán)格控制，染色過久可導(dǎo)致假陽(yáng)性。
2. 由于不同細(xì)胞對(duì)Hoechst 33258 的攝取能力不同，該法不一定適用所有細(xì)胞。

操作方法
1. 用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
2. 用冷Buffer A 洗滌細(xì)胞二次，離心收集106 細(xì)胞于1.5mL 微量離心管中；（貼壁細(xì)胞原位固定染色）
3. 加入1mL 的4%甲醛溶液(用戶自備)，4℃固定細(xì)胞10min；
4. 離心去固定液，用Buffer A 洗兩遍；離心后留50～100μL Buffer A 重懸細(xì)胞；
5. 取上步驟50～100μL 細(xì)胞懸液涂片，自然晾干；
6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液（備注1），室溫染色10 min，水沖凈晾干；
7. 以紫外光340nm 波長(zhǎng)激發(fā)，熒光顯微鏡下觀察。

儲(chǔ)存：2-8℃，避光，有效期一年。
 

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！