"PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞系
細胞背景資料：肺巨細胞癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
細胞生長：貼壁
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞系
MDA-MB-134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞
U-138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
KGN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
THP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
PC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
RAW 264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞系
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN-3細胞、H-196細胞、CWR-22rv1細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HEECs細胞、CESS細胞、SUP-T1細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細胞、HEK AD293細胞、SNU-368細胞
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