"PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺巨細(xì)胞癌
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
PE/CA-PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT-T15細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞
EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HEY A8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細(xì)胞、H-2198細(xì)胞、CMK細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
NCIH1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細(xì)胞、WRL68細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
MDA-MB-134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML3細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
RPVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
NCTC-3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞
NCTC-3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞
3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞
CATH-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M210B4細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞
NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞
AC29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞
VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細(xì)胞、H-196細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細(xì)胞、CESS細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
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關(guān)鍵字: PG-BE1 epithelioid cells人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
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