"PG-BE1 Cell:人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肺巨細胞癌
EC109細胞系相關產品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
OCI-Ly8細胞系相關產品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞
GT38細胞系相關產品：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
Hep-G2細胞系相關產品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PG-BE1 Cell:人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SCL-II細胞系相關產品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
B16 BL6細胞系相關產品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
RBE4細胞系相關產品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關產品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
GS9L細胞系相關產品：Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
細胞生長特性：貼壁
PG-BE1 Cell:人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Mel RM細胞系相關產品：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞
BEND細胞系相關產品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
D407細胞系相關產品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
HME-1細胞系相關產品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
OVMANA細胞系相關產品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
SKMEL24細胞系相關產品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
MPP89細胞系相關產品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
PG-BE1 Cell:人肺巨細胞癌高轉移細胞系
RT-112細胞系相關產品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
Dami細胞系相關產品：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
NCI-H-128細胞系相關產品：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
INS-1細胞系相關產品：BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
CAKI 2細胞系相關產品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
P3-X63Ag8細胞系相關產品：HCC 2185細胞、Reuber H35細胞、H460細胞
EM3細胞系相關產品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
NS1/1-Ag4.1細胞系相關產品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
Huh7.5細胞系相關產品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
Huh7.5細胞系相關產品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
EC-109細胞系相關產品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
OVCAR 8細胞系相關產品：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
FU-MMT-1細胞系相關產品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
CBRH-7919細胞系相關產品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
RT-BM-1細胞系相關產品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
R1800[RA]細胞系相關產品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
LS1034細胞系相關產品：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
H2106細胞系相關產品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
BL-6細胞系相關產品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
Keio University-19-19細胞系相關產品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
IOSE-29細胞系相關產品：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
FET細胞系相關產品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
HNE-2細胞系相關產品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
Walker-256-TC細胞系相關產品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
H-2122細胞系相關產品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
Calu6細胞系相關產品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
AMC-HN8細胞系相關產品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關產品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
DOK細胞系相關產品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
HuH7細胞系相關產品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
P388.D1細胞系相關產品：SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
NP69細胞系相關產品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
130-T細胞系相關產品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關產品：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
HT1197細胞系相關產品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
MDAMB157細胞系相關產品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
EAhy 926細胞系相關產品：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
Tb 1 Lu細胞系相關產品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關產品：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞
J 111細胞系相關產品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
J 111細胞系相關產品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
GBCSD細胞系相關產品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
Walker-256-TC細胞系相關產品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
PG-BE1 Cell:人肺巨細胞癌高轉移細胞系
MOLT4細胞系相關產品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
RIN14B細胞系相關產品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
MDCK supertube細胞系相關產品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
SBC3細胞系相關產品：L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
BC-025細胞系相關產品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞
NCIH660細胞系相關產品：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
A2780 CP70細胞系相關產品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
BEL 7405細胞系相關產品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
UCH-1細胞系相關產品：RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關產品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
Kit 225細胞系相關產品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
Hs 729.T細胞系相關產品：H-820細胞、H-2141細胞、UCLA RO-81A-1細胞
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