MTT細胞增值與毒性檢測試劑盒
中文名稱:MTT細胞增值與毒性檢測試劑盒
英文名稱:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
產品規(guī)格:500T
MTT可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解,然后通過酶標儀可以測定490nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。 使用說明: 1.收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,分于96孔板,每孔180μL,3000-10000個細胞/孔。 2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24小時。 3.加入適當濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。 4.小心吸去上清,加入90μL新鮮培養(yǎng)液,再加入10μL MTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。 5.然后吸掉上清,每孔加入110μL Formazan溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。 6.同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液),每組設定3復孔。 注意事項: 1.由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內水源的地方,以緩解蒸發(fā)。 2.MTT溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。Formazan溶解液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。 3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 儲存條件:-20℃
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