細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)
中文名稱:細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)
英文名稱:JC-1 Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T
本試劑盒可應(yīng)用于細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測。大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),其中線粒體跨膜電位(△?)的破壞,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級聯(lián)反應(yīng)過程中最早發(fā)生的事件之一,它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。 本試劑盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一種陽離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時以單體的形式存在,高濃度時以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細(xì)胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,JC-1可透過正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi),正常健康線粒體的膜電位(△?)具有極性,JC-1依賴于△?的極性被迅速攝入線粒體內(nèi),并因濃度增高而在線粒體內(nèi)形成多聚體,多聚體發(fā)射光為紅色熒光;可被流式細(xì)胞儀的紅色(FL-2)通道檢測到,而細(xì)胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。根椐這一特征檢測線粒體膜電位的變化。 注意事項 1. 微量試劑取用前請離心集液。 2. JC-1 避光保存及使用。 3. 細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度80-90%,收集細(xì)胞量在1×106/Test。 4. 對PH 變化過于敏感的細(xì)胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,或延長觀測時間。 5. 流式細(xì)胞儀檢測線粒體膜電位變化受到多種因素的影響,因誘導(dǎo)劑、細(xì)胞株類型,作用時間的不同而熒光強度比例都有不同,因此沒有通用標(biāo)準(zhǔn)的補償設(shè)門指南,因此每個試驗需設(shè)陰性及陽性對照組進(jìn)行熒光補償及設(shè)門。 6. 組織需先制備單細(xì)胞懸液或提取純化線粒體后方可進(jìn)行檢測,可選用我司細(xì)胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
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