"SK-MEL-1 epithelioid cells人皮膚黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞 SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞 MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞 細胞生長:貼壁 SK-MEL-1 epithelioid cells人皮膚黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:維持細胞濃度在1×105-2×105,每周補液2-3次。 HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞 IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞 TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞 L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞 GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-MEL-1 epithelioid cells人皮膚黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:球形的 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞 Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞 Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞 PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞 SKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞 RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞 EFM192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8-653細胞、HSC(Human Schwann)細胞、SU-DHL-8細胞 OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞 SK-MEL-1 epithelioid cells人皮膚黑色素瘤細胞系 H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞 Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞 RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞 OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞 SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞 CT 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞 SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞 IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞 IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞 SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞 HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞 MV 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞 LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞 HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞 MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞 SBC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞 L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞 PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞 NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞 WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞 HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞 CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞 FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞 HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞 MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞 67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞 T47D:A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞 hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞 Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞 HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞 NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞 NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞 Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞 LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞 Co320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞 Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞 T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞 SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞 beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞 PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞 RPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞 CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞 SK-MEL-1 epithelioid cells人皮膚黑色素瘤細胞系 L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞 B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細胞、Hs 746T細胞、Panc04.03細胞 IM-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細胞、CCC-HPF-1細胞、NCI-H1954細胞 Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細胞、hTERT RPE-1細胞、HITT15細胞 "
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