"RPMI-7951 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞 H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞 KU 19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 RPMI-7951 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2天換液1次。 L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞 A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞 Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞 Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞 Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 RPMI-7951 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 NCI-H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-407細(xì)胞、Case 3細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞 H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、H1618細(xì)胞 NCI-SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞、H2591細(xì)胞 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 RIN Cl-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB19細(xì)胞、HCC9204細(xì)胞、GM15452細(xì)胞 SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞 MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞 DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞 ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞 P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞 RPMI-7951 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞 R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞 HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞 INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞 G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞 G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞 MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞 Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞 Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞 P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞 H-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc813細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞 SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞 118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞 LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞 HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞 alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞 NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞 HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞 SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞 MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞 BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞 COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞 231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞 HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞 MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞 Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞 RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞 Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞 SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞 SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞 NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞 LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞 SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞 Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞 10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞 MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞 SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞 SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞 SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞 KYSE 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