"HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 HBE 135-E6E7細胞系相關產品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞 GBCSD細胞系相關產品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞 MA 104細胞系相關產品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞 細胞生長:貼壁 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質合成速度降低,已有蛋白質結構變化,特異蛋白質成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:3-1:8傳代,2-3天換液1次。 U 266細胞系相關產品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞 RCK-8細胞系相關產品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞 RBVEC細胞系相關產品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞 CCD-1095Sk細胞系相關產品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞 5637細胞系相關產品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 OC-316細胞系相關產品:ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞 786-O細胞系相關產品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞 MV4-11細胞系相關產品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞 NCIH716細胞系相關產品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞 APRE-19細胞系相關產品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞 Mo 59J細胞系相關產品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞 Scott細胞系相關產品:GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞 Det 562細胞系相關產品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞 Hs819T細胞系相關產品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 My-La 2059細胞系相關產品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞 RKO-AS-45-1細胞系相關產品:SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞 SW1271細胞系相關產品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞 SHP-77細胞系相關產品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 LAN1細胞系相關產品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞 HT 1376細胞系相關產品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞 HT 1376細胞系相關產品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞 SKLU-1細胞系相關產品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞 NIH-3T3-L1細胞系相關產品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞 ROS17/28細胞系相關產品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞 VMM-5A細胞系相關產品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞 ML2細胞系相關產品:HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞 HEC251細胞系相關產品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞 Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞 CAL 12T細胞系相關產品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞 SUDHL-1細胞系相關產品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞 Nittby-Salford 1細胞系相關產品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞 MRC 5細胞系相關產品:BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞 HFTF細胞系相關產品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞 R 2 C細胞系相關產品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞 3T3(A31)細胞系相關產品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 H-508細胞系相關產品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞 LA795細胞系相關產品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞 ADR-RES細胞系相關產品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞 MCF-7細胞系相關產品:MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞 U-87MG ATCC細胞系相關產品:BJ [Human fibroblast]細胞、SW 1222細胞、HT-1376細胞 C2BBe 1細胞系相關產品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 IPI-2I細胞系相關產品:KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞 PC12(高分化)細胞系相關產品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞 T 24細胞系相關產品:MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞 8305-C細胞系相關產品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞 KP-4細胞系相關產品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞 MESSA細胞系相關產品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞 FHL 124細胞系相關產品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 K422細胞系相關產品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞 Human 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