Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
中文名稱:Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素FITC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開來。 本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。 注意事項(xiàng) 1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。 2. Annexin V-FITC,Propidium Iodide (PI)避光保存及使用。對(duì)于Annexin V-FITC 這個(gè)組份,建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。 3. Propidium Iodide(PI)有毒,操作時(shí)要戴手套。 4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。 5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,需用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。 6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。 7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。
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