"COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
細胞生長：貼壁
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
MDA MB 436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
H-2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞
Hs-675-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
LS-411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞、OVCA433_Bast細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
HOP92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞
ECC12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
MEG01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
HS-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞
COLO 829 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、CNE2細胞、T-CAM2細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、HS 683T細胞、RH35細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、TU 686細胞、SW-1222細胞
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