"COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞 P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞 P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞 P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞 DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞 PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞 JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞 CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞 U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞 M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞 293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞 KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞 WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞 MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞 BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞 RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞 COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 GM 637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL 1細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞、HCT15細(xì)胞 HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞 SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞 FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞 CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞 MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞 MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞 LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞 SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞 293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞 2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞 NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞 HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞 HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞 RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 Hs 274.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU.812細(xì)胞、HECV細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞 JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞 Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞 LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞 LAN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞 SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞 MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞 CBRH-7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞、BT20細(xì)胞 DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞 SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞 HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞 RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞 GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞 PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞 P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞 CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞 SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞 624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞 GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞 BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞 Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞 Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞 TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞 H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞 526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞 Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞 HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞 95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞 293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞 624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞 H-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞 SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞 MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞 Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞 COLO 679 epithelioid cells人黑色素瘤細(xì)胞系 CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞 SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、SNU739細(xì)胞 MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞 "
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