"MIA PaCa-2 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞 NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MIA PaCa-2 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺(tái)內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代; SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞 U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞 Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞 CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞 451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MIA PaCa-2 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞 C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞 DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞 E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞 SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞 P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞 BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞 NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞 H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞 MIA PaCa-2 epithelioid cells人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞 COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞 SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞 PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞 HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞 QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞 PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞 HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細(xì)胞、HPAF細(xì)胞、CHL1細(xì)胞 MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞 OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞 OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 WM239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-IE8細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞 RL952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4:11細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞 EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞 EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞 B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞 U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞 HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞 TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞 GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞 32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞 NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞 HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞 SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞 HSAS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEM15A細(xì)胞、NSH細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞 Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞 CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞 NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞 SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞 NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞 OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞 TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞 F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞 Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞 CT26.CL25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細(xì)胞、H-64細(xì)胞、H2122細(xì)胞 Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞 SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞 28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞 OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞 H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞 Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞 L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞 Hs 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞 NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞 A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 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