"MIA PaCa-2 Cell:人胰腺導管癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
C3H10T1-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-1細胞、BT 325細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MIA PaCa-2 Cell:人胰腺導管癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代；
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MIA PaCa-2 Cell:人胰腺導管癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
MIA PaCa-2 Cell:人胰腺導管癌細胞系
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
Panc 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
FHCRC subclone 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞
FHCRC subclone 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
SKN-SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606細胞、GOS-3細胞、B16-F0細胞
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
SF767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
HIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
MIA PaCa-2 Cell:人胰腺導管癌細胞系
KM12 SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
KS-SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、GM17346細胞、EOC-20細胞
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