"TOV-21G epithelioid cells人上皮性卵巢癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 HUT 125細胞系相關產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞 OCI-AML-2細胞系相關產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞 PC-3M 2B4細胞系相關產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞 細胞生長:貼壁 TOV-21G epithelioid cells人上皮性卵巢癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:3-1:4傳代,3-4天換液1次。 Hep G2細胞系相關產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞 HFL-I細胞系相關產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞 N1S1細胞系相關產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞 Hs 578Bst細胞系相關產(chǎn)品:HCC1171細胞、Tu686細胞、J82細胞 HEp-2細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 TOV-21G epithelioid cells人上皮性卵巢癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 Karpas422細胞系相關產(chǎn)品:CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞 LS1034細胞系相關產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞 BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 SK-N-F1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞 KPL4細胞系相關產(chǎn)品:GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞 3T3 Swiss Albino細胞系相關產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞 PANC1005細胞系相關產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞 COLO206F細胞系相關產(chǎn)品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 HDSMC細胞系相關產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞 TOV-21G epithelioid cells人上皮性卵巢癌細胞系 SACCLM細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞 NUGC2細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞 P31 FUJ細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞 KMH-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞 RL952細胞系相關產(chǎn)品:MV-4:11細胞、IA-LM細胞、Sf-21細胞 RL細胞系相關產(chǎn)品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞 RL細胞系相關產(chǎn)品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產(chǎn)品:OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞 KY180細胞系相關產(chǎn)品:SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞 CEMO-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞 SP2細胞系相關產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞 MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞 HemECs細胞系相關產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞 MDAMB134細胞系相關產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞 COLO-320-DM細胞系相關產(chǎn)品:GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞 Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞 U118MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞 KMB 17細胞系相關產(chǎn)品:MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞 CAL 148細胞系相關產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞 8226細胞系相關產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞 DMS 273細胞系相關產(chǎn)品:AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞 HC-11細胞系相關產(chǎn)品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞 HA細胞系相關產(chǎn)品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞 NCTC1469細胞系相關產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞 OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞 Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞 PANC0403細胞系相關產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞 JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞 SV-HUC細胞系相關產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞 HANK細胞系相關產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 SF 767細胞系相關產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞 HCC1438細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞 FaDu細胞系相關產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞 RS4-11細胞系相關產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞 TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞 HG2855細胞系相關產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞 IOSE-29細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞 IOSE-29細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞 CL1-0細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 M1細胞系相關產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞 NCIH2107細胞系相關產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞 B-16細胞系相關產(chǎn)品:SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞 SNU398細胞系相關產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞 EOL1細胞系相關產(chǎn)品:H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞 VMM39細胞系相關產(chǎn)品:A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞 SUDHL-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞 PC10細胞系相關產(chǎn)品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞 NCI-SNU-449細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞 NCI-H522細胞系相關產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞 NBL-3細胞系相關產(chǎn)品:RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞 TOV-21G epithelioid cells人上皮性卵巢癌細胞系 CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品:SNU-869細胞、PC 12細胞、HTori-3細胞 NCIH2066細胞系相關產(chǎn)品:CAL-62細胞、HFSF細胞、ANA1細胞 BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、ssMCF-7細胞、NCI/ADR-RES細胞 "
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