"LK-2 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCI/ADRRES細胞系相關產品：118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
TW01細胞系相關產品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
KYSE-50細胞系相關產品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
細胞生長：貼壁
LK-2 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RCK8細胞系相關產品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
RCC4細胞系相關產品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
HCT_116細胞系相關產品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
H8細胞系相關產品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
UM-RC-2細胞系相關產品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
LK-2 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
YES 2細胞系相關產品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
WM451Lu細胞系相關產品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
FUOV1細胞系相關產品：COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
GM04671細胞系相關產品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
Hep G2-Luc細胞系相關產品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
SKNBE(1)細胞系相關產品：WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
MeT5A細胞系相關產品：OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
32D/cl3細胞系相關產品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
SW780細胞系相關產品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
LK-2 epithelioid cells人肺癌細胞系
CAL-85-1細胞系相關產品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
MDA 435細胞系相關產品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞
SKLMS1細胞系相關產品：SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關產品：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞
CoC1細胞系相關產品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
FAO-1細胞系相關產品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
FAO-1細胞系相關產品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
H-2330細胞系相關產品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
HHFK細胞系相關產品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
TN5B14細胞系相關產品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
NK-92 MI細胞系相關產品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
Keio University-19-19細胞系相關產品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
ETCC-007細胞系相關產品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
T-ALL 1細胞系相關產品：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
SJRH 30細胞系相關產品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
HIT T15細胞系相關產品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
Be-Wo細胞系相關產品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
GM05862細胞系相關產品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
PANC3.27細胞系相關產品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
IAR 20細胞系相關產品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
NCIH441細胞系相關產品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
GM03569D細胞系相關產品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
AHH-1細胞系相關產品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
HTori:3細胞系相關產品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
149PT細胞系相關產品：MOLT-4細胞、NCIH2405細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞
SHI1細胞系相關產品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關產品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
MGC803細胞系相關產品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
Hep3B細胞系相關產品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
L-M (TK-)細胞系相關產品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
H524細胞系相關產品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
CAOV4細胞系相關產品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
SJRH-30細胞系相關產品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
NGP細胞系相關產品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
PBMC細胞系相關產品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
BEL-7405細胞系相關產品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
JEKO細胞系相關產品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
P3X63細胞系相關產品：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
OSC19細胞系相關產品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
OE-19細胞系相關產品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
D-324 Med細胞系相關產品：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
HBZY1細胞系相關產品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關產品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
HEK293-EBNA1細胞系相關產品：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞
NCIH650細胞系相關產品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
FM-88細胞系相關產品：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
HCE細胞系相關產品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
H-647細胞系相關產品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
MESSA-DX5細胞系相關產品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
PC.3細胞系相關產品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
COV504細胞系相關產品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
LK-2 epithelioid cells人肺癌細胞系
Kit225-K6細胞系相關產品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
MDA-1386細胞系相關產品：786-0細胞、HCCC9810細胞、NCIH1568細胞
RBL-2H3細胞系相關產品：EFM192B細胞、Farage Original Line細胞、Z-138細胞
FUOV1細胞系相關產品：COLO320 DM細胞、SW 948細胞、MDAMB330細胞
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