"NCI-H748 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞 MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞 HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H748 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:3-4天換液1次。 Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞 U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞 BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞 NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞 SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H748 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞 SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞 HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞 6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞 H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞 OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞 Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞 RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞 ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞 NCI-H748 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞 NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞 Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞 UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞 High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞 C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞 SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞 As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞 MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞 R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞 SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞 MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞 SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞 DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞 U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞 L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞 NCI-H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞 3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞 EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞 Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞 SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞 A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞 HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞 SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞 Caco2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞 Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞 HuH 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞 M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞 MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞 HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞 IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞 C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞 293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞 HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞 Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞 HM06.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞 SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞 WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞 Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞 SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞 HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞 NCI-H748 epithelioid cells人小細胞肺癌細胞系 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞 DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細胞、GM04671細胞、PLA-801D細胞 H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL27細胞、HSC/mHSC細胞、NCTC1469細胞 HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、GH3細胞、RIMEC細胞 "
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