"C166 epithelioid cells小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:血管內(nèi)皮
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
A 375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
C166 epithelioid cells小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
C166 epithelioid cells小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
TFH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
C166 epithelioid cells小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞系
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
UM-UC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞、Psi2-DAP細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
SW48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2452細(xì)胞、LAN5細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
C166 epithelioid cells小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞系
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞
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