"RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:2型腺病毒轉(zhuǎn)化;SD大鼠 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! NCTC 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDrTC細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞 HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞 LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞 REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞 OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞 SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞 L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞 MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞 Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞 WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞 ARO81-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS2細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞 CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞 UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞 H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞 RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞 RBE4 epithelioid cells大鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞系 L-540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞 LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞 UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞 Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞 no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞 HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞 HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞 CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞 293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞 MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞 PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞 CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞 UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞 Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞 HEK 293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKML-28細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞 MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞 MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞 NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞 H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞 NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞 NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞 Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞 KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞 MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞 SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞 H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞 B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞 Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞 SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞 TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞 TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞 Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞 SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞 NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞 NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞 RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞 769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞 CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞 GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞 Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞 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