"JVM-2 Cell:EB病毒感染的人外周淋巴細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:該細胞是 J.V.Melo從一位63歲患有套細胞淋巴瘤白人女性外周血中分離建立的,經(jīng)EBV介導(dǎo)獲得永生化,該細胞表達p16和細胞周期蛋白D2,低水平表達細胞周期蛋白D1。
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
JVM-2 Cell:EB病毒感染的人外周淋巴細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
細胞生長特性:懸浮生長
JVM-2 Cell:EB病毒感染的人外周淋巴細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣
PLA801-95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
JVM-2 Cell:EB病毒感染的人外周淋巴細胞系
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞
MCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
NCI-H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
SKCO 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
JVM-2 Cell:EB病毒感染的人外周淋巴細胞系
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
MOVAS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細胞、B16-F10-BL6細胞、NCIH1651細胞
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