"NCI-H727 epithelioid cells人肺支氣管良性腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞 GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞 Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H727 epithelioid cells人肺支氣管良性腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:每周換液2次。 C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞 CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞 COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞 NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞 MFE280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H727 epithelioid cells人肺支氣管良性腫瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞 PCI-4M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE1細(xì)胞、52PE細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞 A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞 HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞 MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞 AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞 SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞 Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:My-La 2059細(xì)胞、NKL細(xì)胞、NKL細(xì)胞 H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞 CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞 NCI-H727 epithelioid cells人肺支氣管良性腫瘤細(xì)胞系 A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞 Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞 BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞 CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞 A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞 A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞 GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞 JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞 MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞 MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞 Tn 5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞 SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞 SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞 HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞 TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞 HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞 Granta 519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET-1A細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞 NCI-H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞 HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞 KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞 UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞 SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞 PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞 PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞 OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞 PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞 Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞 32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞 MPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞 Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞 QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞 VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、SW-948細(xì)胞 T-HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞 RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞 TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞 HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞 GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞 CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞 AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞 NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞 RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞 OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞 OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞 RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞 Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞 KY-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞 SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞 Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞 HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞 LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞 NCI-H727 epithelioid cells人肺支氣管良性腫瘤細(xì)胞系 HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞 EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細(xì)胞、SC1細(xì)胞、BC-027細(xì)胞 H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞 A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞 "
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