"NCI-H322 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數活細胞數,用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 Vero細胞系相關產品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞 b.End3細胞系相關產品:Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞 MiaPaCa2細胞系相關產品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H322 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質合成速度降低,已有蛋白質結構變化,特異蛋白質成份出現;同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2傳代 KTCTL-140細胞系相關產品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞 Hs600T細胞系相關產品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞 K-1735細胞系相關產品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞 HPAF-II/CD18細胞系相關產品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞 NCIH1869細胞系相關產品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 NCI-H322 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 HME1細胞系相關產品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞 Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關產品:H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞 UMRC-2細胞系相關產品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞 SG231細胞系相關產品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞 P3-Jiyoye細胞系相關產品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞 HMEC1細胞系相關產品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 TKB1細胞系相關產品:Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 NCTC clone 929細胞系相關產品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞 THC-8307細胞系相關產品:LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞 SCL-I細胞系相關產品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞 NCI-H322 epithelioid cells人肺癌細胞系 MKN-45細胞系相關產品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞 OVCA-420細胞系相關產品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞 FET細胞系相關產品:CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞 H1355細胞系相關產品:NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞 SKG-IIIa細胞系相關產品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞 SNU-739細胞系相關產品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞 SNU-739細胞系相關產品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞 HNEpC細胞系相關產品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞 SW954細胞系相關產品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞 SJSA1細胞系相關產品:L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞 Calu 6細胞系相關產品:LAN6細胞、H220細胞、K299細胞 NCIH1703細胞系相關產品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 P36細胞系相關產品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞 PTK2細胞系相關產品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞 DMS153細胞系相關產品:PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞 CHO Lec1細胞系相關產品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞 SKRC 39細胞系相關產品:JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞 CCD-1112sk細胞系相關產品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 N1S1細胞系相關產品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞 SK-RC 39細胞系相關產品:TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞 SKNBE-2細胞系相關產品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞 UT7細胞系相關產品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞 CT26.WT細胞系相關產品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞 H4-IIE-C3細胞系相關產品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞 SUDHL-16細胞系相關產品:F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞 CNE細胞系相關產品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞 DAN-G細胞系相關產品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞 CHO-ori細胞系相關產品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞 STO細胞系相關產品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞 HBZY 1細胞系相關產品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞 NIH 3T3細胞系相關產品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞 SGC-7901/DDP細胞系相關產品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 B 95-8細胞系相關產品:DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞 SNU-1040細胞系相關產品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞 NCI-H2286細胞系相關產品:SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞 B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞 SVOG細胞系相關產品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞 HLE B-3細胞系相關產品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞 HLE B-3細胞系相關產品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞 HLE-SRA-01/04細胞系相關產品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞 HEC1-A細胞系相關產品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞 GCT0404細胞系相關產品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞 TE 671細胞系相關產品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞 H-2452細胞系相關產品:S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞 RBL細胞系相關產品:MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞 P3J細胞系相關產品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞 OCI-Ly 19細胞系相關產品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞 P36細胞系相關產品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞 SW-780細胞系相關產品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 RPMI #8226細胞系相關產品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 H3255細胞系相關產品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞 NCI-H322 epithelioid cells人肺癌細胞系 OCI-LY-7細胞系相關產品:HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞 COLO.205細胞系相關產品:PC3細胞、OCI-AML4細胞、NCIH2196細胞 HeLa-S3細胞系相關產品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 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