"BT-20 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９５８年由E.Y. Lasfargues 和 L. Ozzello 建系，源自一位７４歲白人女性的乳腺癌組織。該細(xì)胞表達(dá)WNT３和WNT７８。TNF alpha抑制該細(xì)胞生長(zhǎng)。該細(xì)胞雌激素受體陰性，但表達(dá)５＇外顯子缺失的雌激素mRNA。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
BT-20 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２—１：４傳代，２—３天換液一次
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
8305C_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞
COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
ANA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BT-20 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞
H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
BT-20 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞
WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞
S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
HaCaT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞
WM266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞
SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞
AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
NCI H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB9細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、J45.01細(xì)胞
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞
CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2110細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞
UMNSAH-DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC10細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞
BT-20 epithelioid cells人乳腺癌細(xì)胞系
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞、H1703細(xì)胞
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