"BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
G401細胞系相關產(chǎn)品:PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
NBLS細胞系相關產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
EAC細胞系相關產(chǎn)品:U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
細胞生長:貼壁
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
GM-346細胞系相關產(chǎn)品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
KP-2細胞系相關產(chǎn)品:NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
B16F1細胞系相關產(chǎn)品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品:CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
MKN-1細胞系相關產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
SKES1細胞系相關產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
Saos2細胞系相關產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
HSC5細胞系相關產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
C4I細胞系相關產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
MV4-11細胞系相關產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
Det 562細胞系相關產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
VMM5A細胞系相關產(chǎn)品:CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
U343細胞系相關產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
H2085細胞系相關產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
GNM細胞系相關產(chǎn)品:SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
U2932細胞系相關產(chǎn)品:RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
NCI-H295細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
MDA361細胞系相關產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
NBL-12細胞系相關產(chǎn)品:PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
Strain KB細胞系相關產(chǎn)品:6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
JeKo 1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
PG-LH7細胞系相關產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
B16 BL6細胞系相關產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
NCIH1781細胞系相關產(chǎn)品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
CORL105細胞系相關產(chǎn)品:HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
NCI-H1838細胞系相關產(chǎn)品:A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
ZR-75-1細胞系相關產(chǎn)品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
NCI-H522細胞系相關產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
H146細胞系相關產(chǎn)品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
Mel-624細胞系相關產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
AQ-Mel細胞系相關產(chǎn)品:SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
H-676B細胞系相關產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
SCC 4細胞系相關產(chǎn)品:JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
MDA-468細胞系相關產(chǎn)品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
HUCCT1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
GM3190細胞系相關產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
4175細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
SCLC-21H細胞系相關產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
Hs 27細胞系相關產(chǎn)品:TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
Walker256細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
HCEC-12細胞系相關產(chǎn)品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
Nb2細胞系相關產(chǎn)品:C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
GM15452細胞系相關產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品:DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
SkMel31細胞系相關產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
L M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產(chǎn)品:hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
RAW2647細胞系相關產(chǎn)品:P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
EB-2細胞系相關產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
BSC-40細胞系相關產(chǎn)品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
COLO-320-HSR細胞系相關產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
Caov-4細胞系相關產(chǎn)品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
NCI-441細胞系相關產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
BC-020 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
MBMEC細胞系相關產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
H-1373細胞系相關產(chǎn)品:HCO細胞、hFOB 1.19細胞、NSC34細胞
WBF344細胞系相關產(chǎn)品:HCC1428細胞、BE(2)M-17細胞、NCI H69細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:Y3M細胞、WM266mel細胞、VMCUB-1細胞
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